Invitrogen™ NuPAGE Tris-Asetat Protein Jelleri

Protein Ayrımı için Doğru NuPAGE Tris-Asetat Jeli Seçin

Doğru jel ve çalışan tampon kombinasyonunu seçerek yüksek moleküler ağırlıklı proteinlerinizin optimum ayrılmasını elde edin. NuPAGE Tris-Asetat protein jelleri, %7’lik bir poliakrilamid konsantrasyonu ve %3-8’lik bir gradyanla gelir. Jeller iki boyutta gelir: mini (8 cm x 8 cm) veya midi (8,7 cm x 13,3 cm) ve 1,0 mm (mini ve midi jeller) veya 1,5 mm (yalnızca mini jel formatı) kalınlık. NuPAGE Tris-Asetat jelleri ayrıca birden çok kuyu formatına sahiptir. Mini jeller,  Thermo Fisher Scientific Invitrogen XCell SureLock Mini-Cell veya Mini Jel Tankı kullanılarak çalıştırılabilir. Midi jeller, XCell4 SureLock Midi-Cell kullanılarak veya uygun şekilde adaptörler kullanılarak Bio-Rad Criterion™ Cell ile çalıştırılabilir.

Yüksek moleküler ağırlıklı (HMW) proteinlerin güvenilir şekilde ayrılması ve transferi, yaşam bilimi araştırmacıları için ortak bir zorluktur. Doğru jeli seçmek, HMW proteinlerinin başarılı transferinde anahtar faktördür. Popüler bir genel kullanım jeli, karışık bir protein aralığını etkili bir şekilde ayırabilen %4-20 Tris-glisin jelidir. Bununla birlikte, HMW proteinleri, jelin üst kısmındaki dar bir bölgeye sıkıştırılacaktır. HMW proteinleri için daha iyi bir seçenek, bir Tris-asetat jeli veya düşük oranda gradyan olmayan Tris-glisin veya Bis-Tris jelidir. HMW proteinlerini özel olarak hedeflerken, bir Tris-asetat jeli ile optimal transfer sağlanabilir.

Tris-asetat jeller, nötr bir pH’ı korur ve HMW proteinlerini Bis-Tris veya Tris-glisin jellerinden daha yüksek çözünürlükle ayırır. Farklı jel kimyaları ve gradyanları kullanılarak HMW protein ayrımının karşılaştırılması, %3-8 Tris-asetat jel kullanılarak HMW proteinlerinin en iyi ayrılmasını ve çözünürlüğünü gösterir. Bu artan çözünürlük, artan aktarım verimliliğine ve daha yüksek hassasiyete yol açar.

Tris-asetat jelleri, HMW proteinlerinin en iyi şekilde ayrılmasını sağlar. (A) Sarı gölgeli alanlarda en iyi sonuçlar elde edilir. (B) %4-20 Tris-glisin jeli üzerinde tris-asetat jeli kullanılarak daha iyi transfer görülür: Tris-asetat jeli üzerinde 9 ng, tris-glisin gradyan jeli üzerinde 620 ng görselleştirilir.

NuPAGE Tris-Acetate Jeli Özellikleri

• Yüksek çözünürlük—jeller, yüksek moleküler ağırlıklı proteinlerin optimum şekilde ayrılmasını sağlar
• Daha iyi protein bütünlüğü—örnek hazırlama süreci, proteinlerinizi korumaya yardımcı olmak için optimize edilmiştir
• Daha uzun raf ömrü—jeller en az 8 ay saklanabilir
• NuPAGE Tris-Asetat Jelleri SDS içermez ve bu nedenle doğal veya denatüre formdaki proteinleri ayırmak için kullanılabilir. Denatüre proteinler için LDS numune tamponu ve tris-asetat SDS çalıştırma tamponu kullanmanızı öneririz. Doğal proteinler için geleneksel Tris-glisin doğal numune tamponu ve bir Tris-glisin doğal çalışan tamponu kullanılmalıdır.

 

NuPAGE Tris-Asetat Jelleri, üç iyon içeren süreksiz bir tampon sistemi kullanır:

• Asetat (–) jel tamponundandır ve sistemdeki diğer anyonlara göre anoda yüksek afinitesi nedeniyle öncü iyon görevi görür. Jel tampon iyonları tris (+) ve asetat (–)’dir (pH 7.0).
• Trisin (-) çalışan tampondandır ve takip eden iyon görevi görür. Çalışan tampon iyonları tris (+), trisin (–) ve dodesilsülfattır (pH 8.3).
• Tris (+), jel tamponunda ve çalışan tamponda bulunan ortak iyondur. Tris-asetat sistemi ayrıca elektroforez sırasında önemli ölçüde daha düşük çalışma pH’ı olan 8.1’de çalışır.